GB/T 29405-2012 粮油检验 谷物及制品脂肪酸值测定 仪器法

【范围】
本标准规定了光度滴定仪法和智能电位滴定仪法测定谷物及制品脂肪酸值的术语和定义、原理、试剂与材料、仪器和设备、操作步骤、结果计算与表示。
本标准光度滴定仪法适用于稻谷、糙米、大米脂肪酸值的测定，智能电位滴定仪法适用于玉米、稻谷、糙米、大米、小麦粉脂肪酸值的测定。

【术语和定义】
脂肪酸值  fat acidity
试样中游离脂肪酸的含量。以中和100g试样干物质中游离脂肪酸所需氢氧化钾的毫克数表示，即以干基KOH计单位为mg/100g。

【光度滴定法】
原理
在一定温度条件下，用无水乙醇提取试样中的游离脂肪酸，以百里香酚蓝指示液做指示剂，用氢氧化钾标准溶液滴定。采用光学传感器检测透过滴定体系溶液的光能量变化，

自动判定滴定终点，人工读数或自动记录提取液消耗氢氧化钾标准溶液的体积。同时，通过微处理器系统，利用内置模式识别系统来控制滴定过程和处理滴定结果。

【仪器和设备】
光度滴定仪: 配75mL测量杯和加液装置。加液装置体积精度0.01mL。光度滴定仪分为全自动光度滴定仪和半自动光度滴定仪。
天平: 感量0.01g。
振荡器: 往返式，振荡频率为100次/min。
实验砻谷机。
粉碎机: 带0.8mm圆孔筛片的锤式磨，粉碎时应保持样品不发热。
具塞磨口锥形瓶: 250mL。
玻璃短颈漏斗。
移液管: 50mL、25mL、10mL。
具塞试管(大于25mL)或具塞锥形瓶(50mL)。

【滴定】
光度滴定仪的滴定管加满氢氧化钾标准滴定溶液，并自动校正零点。用25mL移液管准确移取25.0mL滤液至测量杯中，再用另一支移液管准确移取25.0mL百里香酚蓝指示液至测量杯中，加入搅拌子。

将测量杯放入仪器测量池中并盖上盖，启动"滴定"按钮，当"终点"指示灯亮时即为滴定终点，光度滴定仪自动停止滴定。
采用半自动光度滴定仪滴定，人工记下所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V₁)。采用全自动光度滴定仪滴定，仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V₁)。

【空白试验】
用25.0mL无水乙醇代替滤液，其余操作同上 。采用半自动光度滴定仪滴定，人工记下所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V₀)。采用全自动光度滴定仪滴定，仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V₀)。

【结果计算】
采用半自动光度滴定仪滴定，试样脂肪酸值(A_K)按式(1)计算:

式中:
A_K一一试样脂肪酸值(以KOH计)，单位为毫克每百克(mg/100g)；
11220一一换算成氢氧化钾毫克数的常数，即56.1×2×100；
V₁一一滴定25mL试样提取液所耗氢氧化钾标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL)；
V₀一一滴定空白液所耗氢氧化钾标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL)；
c  一一氢氧化钾标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
m 一一试祥质量，单位为克(g)；
ω 一一试样水分质量分数，即100g试样中含水的质量，单位为克(g)。
采用全自动光度滴定仪滴定，输入试样含水量和试样质量后，仪器自动计算出试样脂肪酸值(以KOH计)，以毫克每百克表示(mg/100g)。

【智能电位滴定仪法】
原理
在一定温度条件下，用无水乙醇提取稻谷、糙米、大米、玉米中的游离脂肪酸，以苯提取小麦粉中的游离脂肪酸，用氢氧化钾标准溶液滴定，以电极作为指示终点的传感器，

在滴定终点附近，

被测离子的浓度发生突变，引起电极电位的突跃，采用模糊逻辑控制算法(灰度模型)与反向传播算法(BP神经网络)控制滴定过程，采集电极的动态信号，

根据拟和曲线确定滴定终点，仪器自动计量并计算试样脂肪酸值。

【仪器和设备】
除上面规定的外，还包括以下仪器设备:
智能电位滴定仪或电位滴定仪: 配150mL测量杯(杯口可加橡胶密封圈)和馈液装置，最小馈液量0.0005mL，体积精度0.01mL。
pH复合电极: 电极斜率应保证在90%～105%。
磁力搅拌台: 搅拌速度可连续调节。

【滴定】
仪器准备
按仪器操作说明书进行。
滴定
玉米粉、糙米粉、大米粉试样: 用25mL移液管精确移取25.0mL滤液至测量杯中，加入50mL无二氧化碳蒸馏水，放入搅拌子，将测量杯放在磁力搅拌台上，将滴定支架落下，电极与进液管浸入液面下。
小麦粉试样: 用25mL移液管精确移取25.0mL滤液至测量杯(带有橡胶密封圈)中，再用另一支25mL移液管移取25.0mL 95%乙醇至测量杯(带有橡胶密封圈)中，加入搅拌子。

将测量杯(带有橡胶密封圈)放在磁力搅拌台上，将带有密闭上盖的滴定支架落下，电极与进液管浸入液面下。
根据被测试样选择"玉米"、"稻谷"(稻谷、糙米、大米样品均选择"稻谷")、"小麦"按键后，按"启动"键开始测定，仪器自动判断终点并停止滴定。仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V₁)。

【空白试验】
测定玉米粉、大米粉试样时用25.0mL无水乙醇、测定小麦粉试样时用苯代替滤液，其余操作同上。仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V₀)。

【结果计算】
输入试样含水量和试样质量，仪器自动计算出试样脂肪酸值(以KOH计)，以毫克每百克表示(mg/100g)。

京都电子KEM 光度滴定仪和智能电位滴定仪一体机AT-710S
AT-710S可同时记录光学传感器光能量变化和pH复合电极电位变化，并处理滴定结果。

【实验仪器制备，推荐使用】脂肪酸值测定

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